Микроскоп, предназначенный для визуального наблюдения, дает мнимое изображение. При киносъемке через микроскоп объектив из киноаппарата удаляется, его заменяет оптическая система микроскопа, перефокусированная таким образом, чтобы микроскоп действовал как проекционный прибор.
Получить действительное изображение микрообъекта на светочувствительном слое кинопленки в киносъемочном аппарате можно следующими способами.
1. Удалив окуляр и верхнюю выдвижную часть тубуса микроскопа, надо установить киноаппарат так, чтобы плоскость светочувствительного слоя кинопленки в кадровом
окне совпала с плоскостью изображения, образуемого объективом микроскопа.
Качество изображения при безокулярной съемке будет хорошим, если применяются объективы-ахроматы, дающие слабое увеличение, или макроанастигматы. Объектшш-апо-хроматы без окуляров дают изображение с неустранимой хроматической аберрацией.
2. Удалив окуляр, надо установить киноаппарат на расстояние, значительно превышающее длину тубуса микроскопа. Тогда расстояние от объектива до изображения складывается из двух расстояний: механической длины тубуса микроскопа (160 мм) и расстояния от верхнего конца тубуса до плоскости изображения.
Качество изображения здесь хуже, чем при первом способе, так как объектив микроскопа применяется в условиях, не соответствующих его расчету. Однако при работе со слабыми объективами-ахроматами или микроанастигматами при небольших увеличениях можно получить вполне удовлетворительные результаты.
3. Собрать микроскоп, как для визуального наблюдения, но изменить положение окуляра, несколько приподняв его, чтобы первичное изображение, образованное объективом,
располагалось впереди фокальной плоскости окуляра. Тогда построение изображения окуляром по существу будет аналогичным построению изображения объективом: окуляр
как бы репродуцирует первичное изображение и отбрасывает его на светочувствительный слой кинопленки. Окончательное изображение на кинопленке будет по отношению
к объекту прямым, действительным и увеличенным. Увеличение будет равно произведению собственных увеличений объектива и окуляра.
Незначительное изменение расстояния от объектива до первичного изображения (которое в этом случае будет несколько короче, а расстояние до объекта, наоборот, увеличится) практически весьма мало повлияет на степень увеличения.
Если расстояние от глазной линзы окуляра до плоскости действительного изображения (плоскости эмульсионного слоя кинопленки в кадровом окне киноаппарата) будет равно 250 мм, то увеличение при съемке будет равно увеличению при визуальном наблюдении.
Изменение фокусировки объектива микроскопа для получения действительного изображения отрицательно сказывается на резкости, особенно при работе с микрообъекти-вами, дающими сильное увеличение. Поэтому при использовании сильных объективов применяют специальные фотографические окуляры, которые дают возможность путем передвижения только глазной линзы получать действительное изображение без нарушения рассчитанных рабочих состояний объектива микроскопа.
4. Вместо окуляра установить на микроскопе негативную линзу, помещая ее между микрообъективом и даваемым им изображением на расстоянии, меньшем, чем фокусное расстояние линзы. Такая совокупность микрообъективов в сочетании с отрицательной линзой дает прямое, действительное и увеличенное изображение. Негативные линзы рассчитаны для работы с укороченным тубусом микроскопа. Для них длина тубуса укорачивается на 45 мм. Поскольку диаметр негативных линз больше, чем у обычных окуляров, их устанавливают в широкий тубус микроскопа при помощи переходного кольца.
Киносъемка через микроскоп должна производиться на специальной установке, исключающей возможность передачи вибрации, работающего механизма киноаппарата микроскопу. Желательно, чтобы киносъемочный аппарат, соединяемый с микроскопом, давал возможность видеть изображение на матовом стекле («Пентафлекс-16», «Конвас-автомат» или любой профессиональный киносъемочный аппарат).
Для съемки через микроскоп киноаппаратами, не имеющими устройства для визирования изображения по матовому стеклу, применяют светорасщепительные призмы, устанавливаемые на тубус микроскопа перед киносъемочным аппаратом. После предварительной точной юстировки микроскопа с киносъемочным аппаратом и светорасщепительным устройством можно фокусировать и визировать изображение через специальную визирную трубку.
Освещение объекта под микроскопом при микрокипо-съемке осуществляют теми же методами, что и при визуальном микроскопическом наблюдении, с той разницей, что в качестве источника света применяют более мощную электролампу.
Для лучшего выявления микроструктуры малоконтрастных микропрепаратов применяют контрастные цветные светофильтры, поляризационные светофильтры, а также методы окрашивания препаратов, метод фазового контраста и др.